一 研究背景
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. Z: i; E4 p. Y! S# C厌氧氨氧化是一种生物介导反应，在缺氧条件下，自养厌氧氨氧化细菌会以亚硝酸盐为电子受体，将铵盐转化为氮气。该反应与传统的硝化作用和反硝化作用相比，产生的污泥和温室气体量少、无需有机碳和运行成本低等特点。因此，在富氮废水处理工艺中，这种生物除氮方法具有很大的开创性和应用前景。但该体系对多种环境因子较为敏感，在一定程度上限制了厌氧氨氧化反应在工业上的直接应用。因此，研究人员尝试采用富集氨氧化细菌、生物膜或膜反应器、物理、磁化、电子和生物强化技术方法解决这些问题。也有研究人员采用添加化学物质的方法来增强厌氧氨氧化过程。
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锰具有特殊的物理化学性质，锰氧化物在海洋沉积物中扮演了重要的角色。氧化锰的去氧化反应与含氮化合物的转化、氮气的生成紧密相关。研究表明，厌氧氨氧化反应会发生在海洋底泥生态系统中，锰的氧化反应能够促进厌氧氨氧化过程。然而，在人工厌氧氨氧化反应体系中，锰的氧化反应对特异微生物群落的长期影响还未被深入研究，且污水、底泥中的Mno2对厌氧氨氧化反应和特征也是未知的。目前研究发现，不同水流中Mno2的浓度差异较大，厌氧氨氧化反应的最佳Mno2浓度范围仍需要探究。8 F) z( z( f3 ?. x
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二 研究目的
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本研究旨在探究Mno2长期暴露对厌氧氨氧化体系中颗粒的影响，主要包括以下几个方面内容：(a)不同浓度的Mno2对氮去除效率的影响；(b)厌氧氨氧化颗粒性能的变化；(c)微生物群落结构的变化。这些信息能够评估厌氧氨氧化体系对微生物群落稳定性的影响，从而进一步提高工艺水平。3 P' }7 u5 [& @3 S W4 m4 }6 |, ]5 y
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三 材料方法
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: m9 g: H, ^" P0 f污泥获取方法：厌氧氨氧化接种污泥从35±1℃固定温度下运行一年的3.5 L规格升流式厌氧污泥床（UASB）反应器中获取。3 c* ~: G7 w% }0 l0 \+ X7 _. ]" Z
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合成污泥组成元素：反应培养所用的合成污泥由铵盐、亚硝酸盐、无机盐溶液和微量元素组成。& w7 n. G5 ~1 J' y4 O, P
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测定和分析方法：采用苯酚-次氯酸盐法、N（1萘）-乙二胺法、苯酚-二磺酸法、APHA标准方法、加热萃取方法、蒽酮法和改良酚试剂法等对其进行测定和分析。# D9 h+ v9 s* T3 V( I6 K
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取样和测序处理：取在反应器中运行第25、145和175天时的底泥样品，扩增16S RNA的V4区域，测序并进行微生物群落分析。% _% e2 X! d, ]+ l6 g* R+ W" |
, t" @8 R1 E) b1 `% M2 _+ M2 g4 u四 结果与讨论
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. u5 ^7 P/ [" U) g; b1. Mno2对厌氧氨氧化反应的作用
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" G( r8 k! ~- r4 O: r$ @1 w) U从P0到P5阶段，流出水的PH值先降后升，且在50 mg/L Mno2时该反应体系即可达到最佳效果。
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表1 反应器在每个阶段的氮去除性能和化学计量比率, I+ K: n, I6 e7 f- p7 S& v
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2.Mno2对厌氧氨氧化反应中生物颗粒特征的影响
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厌氧氨氧化反应中Mn2+的添加能提高SAA水平。该生物反应对生物量的变化无显著影响（见下图）。
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, m& ~. Y9 D0 k9 K8 M: w; S0 u图1 在不同阶段，反应器中厌氧氨氧化菌的特异厌氧氨氧化活性(SAA)(图A)和生物量的变化。SS：悬浮颗粒，ASS：挥发性悬浮颗粒。
, G9 ]! L) ^) a. T, X# B7 _* I8 L1 t
同时，由下图可猜测该反应产生的血红素C与Mno2的添加有关。5 ^9 d0 a9 E! z
s, m% @$ Z( K6 _% N8 ]
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3 s$ d9 l$ X: R, M. b6 a0 B! R1 r图2 反应器中厌氧氨氧化菌的血红素C含量的变化。& ^/ l: S1 e$ Z2 r# Y2 F
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长期驯化能够提高自养厌氧氨氧化细菌的适应性，Mno2的添加能使微生物产生更多的EPS，EPS的产生可能更有利于脱氮作用。高浓度Mno2使厌氧氨氧化体系有更好的沉降性能。Mno2的长期添加对沉降性能的提高有利（见下图）。
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图3 不同阶段，MnO2的长期添加对厌氧氨氧化菌的胞外聚合物（EPS）数量（图A）和沉降速度-Vs（图B）的影响。
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PN：蛋白质，PS：多糖。
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0 q9 j1 u, H8 x7 y$ ^8 C3. 微生物群落组成和多样性+ N- `: D6 A* ?% j
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由下可知，随着Mno2的持续添加，微生物群落的多样性也持续升高。
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$ h2 j7 n9 p3 S% U- A4 F: Y表2 反应器中污泥样品的细菌多样性指数。
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图4 反应器颗粒污泥中数量比例大于0.5%的微生物群落结构。（A）表示从门类划分。
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图5 反应器颗粒污泥中数量比例大于0.5%的微生物群落结构。（C）表示从属类划分。
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0 S, o* ]- z# S图6 反应器颗粒污泥中数量比例大于0.5%的微生物群落结构。
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（B）表示从属类划分。
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& r u& K8 Z' Q3 o; x4 V) S1 T本文探究了Mno2、细菌和NRR之间的关系。结果显示，浮霉菌门（Planctomycetes）与NRR呈正相关关系，表明在UASB的厌氧氨氧化反应过程中，浮霉菌门（Planctomycetes）对氮的去除起到了积极作用；另外，在该反应中，Candidatus Kuenenia数量比例与TREN值的变化一致，表明Candidatus Kuenenia 对厌氧氨氧化反体系中氮的去除至关重要。
3 i$ f3 k6 A+ f! q$ K. R2 G; y! Z# O1 B6 V- c
五 结论% g, u5 l* K+ j/ Y; L
7 e2 p. S& e# l- f/ Z* r* ?! G长期添加1-200 mg/L的Mno2对氮的去除起到了积极作用。NRR与理化特征（沉降速率-Vs）和生物学特征（SAA、血红素C和EPS）有相同的变化趋势。随着Mno2的持续添加，微生物的优势门、纲、属的丰富度和多样性的变化增长趋势一致。厌氧氨氧化菌（Candidatus Kuenenia）总是保持为优势属。从试验结果和经济方面来看， Mno2浓度达到50 mg/L时，该反应体系即可达到最佳效果。本文研究结果表明，Mno2在anammox体系中起重要作用，它不仅能增强该体系的运行性能，还能起催化作用。
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文章题目：Roles of Mno2 on performance, sludge characteristics and microbial community in anammox system
$ h7 Z1 U( ]0 `/ ~0 @: _2 X发表杂志：Science of the Total Environment0 o0 n8 S$ x) b) n" c$ E
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