一 研究背景8 V2 M2 [7 W& Y
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厌氧氨氧化是一种生物介导反应，在缺氧条件下，自养厌氧氨氧化细菌会以亚硝酸盐为电子受体，将铵盐转化为氮气。该反应与传统的硝化作用和反硝化作用相比，产生的污泥和温室气体量少、无需有机碳和运行成本低等特点。因此，在富氮废水处理工艺中，这种生物除氮方法具有很大的开创性和应用前景。但该体系对多种环境因子较为敏感，在一定程度上限制了厌氧氨氧化反应在工业上的直接应用。因此，研究人员尝试采用富集氨氧化细菌、生物膜或膜反应器、物理、磁化、电子和生物强化技术方法解决这些问题。也有研究人员采用添加化学物质的方法来增强厌氧氨氧化过程。
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锰具有特殊的物理化学性质，锰氧化物在海洋沉积物中扮演了重要的角色。氧化锰的去氧化反应与含氮化合物的转化、氮气的生成紧密相关。研究表明，厌氧氨氧化反应会发生在海洋底泥生态系统中，锰的氧化反应能够促进厌氧氨氧化过程。然而，在人工厌氧氨氧化反应体系中，锰的氧化反应对特异微生物群落的长期影响还未被深入研究，且污水、底泥中的Mno2对厌氧氨氧化反应和特征也是未知的。目前研究发现，不同水流中Mno2的浓度差异较大，厌氧氨氧化反应的最佳Mno2浓度范围仍需要探究。
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二 研究目的
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4 q- J& y8 |; i6 S2 {本研究旨在探究Mno2长期暴露对厌氧氨氧化体系中颗粒的影响，主要包括以下几个方面内容：(a)不同浓度的Mno2对氮去除效率的影响；(b)厌氧氨氧化颗粒性能的变化；(c)微生物群落结构的变化。这些信息能够评估厌氧氨氧化体系对微生物群落稳定性的影响，从而进一步提高工艺水平。
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: R L: t. \% D: {三 材料方法
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污泥获取方法：厌氧氨氧化接种污泥从35±1℃固定温度下运行一年的3.5 L规格升流式厌氧污泥床（UASB）反应器中获取。
* d% H+ |- F6 `4 J. S; N y' B
; v6 P/ V c; {5 P$ e K3 L合成污泥组成元素：反应培养所用的合成污泥由铵盐、亚硝酸盐、无机盐溶液和微量元素组成。. ~. E* d& y4 q+ ]7 R3 V) i6 c
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测定和分析方法：采用苯酚-次氯酸盐法、N（1萘）-乙二胺法、苯酚-二磺酸法、APHA标准方法、加热萃取方法、蒽酮法和改良酚试剂法等对其进行测定和分析。
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8 J |! a% D3 `0 t取样和测序处理：取在反应器中运行第25、145和175天时的底泥样品，扩增16S RNA的V4区域，测序并进行微生物群落分析。' ?4 M8 U0 ^/ J' f4 O8 c
" I; ~" i/ D: U0 T3 ~- F; V四 结果与讨论
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; X/ y1 h" s) t7 J) ~1. Mno2对厌氧氨氧化反应的作用
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' h% z; a5 Z. c# U: k从P0到P5阶段，流出水的PH值先降后升，且在50 mg/L Mno2时该反应体系即可达到最佳效果。
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/ h* N: R' d# ~ _表1 反应器在每个阶段的氮去除性能和化学计量比率, C; G: X7 O9 Y. A
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2.Mno2对厌氧氨氧化反应中生物颗粒特征的影响5 t0 G9 W, n; x) B' V" |$ A
1 O* R l+ n m/ A0 E9 `# U3 F; f厌氧氨氧化反应中Mn2+的添加能提高SAA水平。该生物反应对生物量的变化无显著影响（见下图）。" @" ?# M% x' t+ r/ H
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图1 在不同阶段，反应器中厌氧氨氧化菌的特异厌氧氨氧化活性(SAA)(图A)和生物量的变化。SS：悬浮颗粒，ASS：挥发性悬浮颗粒。
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同时，由下图可猜测该反应产生的血红素C与Mno2的添加有关。
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, ]8 q. Y# {& G( [9 h9 f+ O% q- p' P
+ D! i/ F- d+ b7 N% E8 q$ r$ w7 y4 E; b, {3 }
图2 反应器中厌氧氨氧化菌的血红素C含量的变化。2 r3 c. S/ A. ^* O6 i) u8 o% f
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长期驯化能够提高自养厌氧氨氧化细菌的适应性，Mno2的添加能使微生物产生更多的EPS，EPS的产生可能更有利于脱氮作用。高浓度Mno2使厌氧氨氧化体系有更好的沉降性能。Mno2的长期添加对沉降性能的提高有利（见下图）。" y8 L' L& S4 C
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- U/ J$ v3 M! i* { K图3 不同阶段，MnO2的长期添加对厌氧氨氧化菌的胞外聚合物（EPS）数量（图A）和沉降速度-Vs（图B）的影响。4 j) D; U4 S' |, v
2 f7 v( r1 n- @& PPN：蛋白质，PS：多糖。 z2 V( U+ i3 Y. u
' W! ~" I- e5 H& M& A' s! n) q3. 微生物群落组成和多样性
2 [* Q) y. i3 u, n- Q U9 V% \
$ r$ v9 q& o* y* M2 b8 l: u由下可知，随着Mno2的持续添加，微生物群落的多样性也持续升高。
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0 h4 R- s2 M1 ^( H; j/ r' f表2 反应器中污泥样品的细菌多样性指数。
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: k0 e* ^6 L% g4 R图4 反应器颗粒污泥中数量比例大于0.5%的微生物群落结构。（A）表示从门类划分。
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图5 反应器颗粒污泥中数量比例大于0.5%的微生物群落结构。（C）表示从属类划分。" e* V5 T* f7 Z, N8 B Y! W
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. C3 s9 N& b9 C0 w- @- J( z6 ^图6 反应器颗粒污泥中数量比例大于0.5%的微生物群落结构。 F) W' _2 K- \
6 S) Y1 }5 k f9 ^* @- d1 p# a（B）表示从属类划分。7 j% E: f$ k/ A+ V4 ~8 D* K
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本文探究了Mno2、细菌和NRR之间的关系。结果显示，浮霉菌门（Planctomycetes）与NRR呈正相关关系，表明在UASB的厌氧氨氧化反应过程中，浮霉菌门（Planctomycetes）对氮的去除起到了积极作用；另外，在该反应中，Candidatus Kuenenia数量比例与TREN值的变化一致，表明Candidatus Kuenenia 对厌氧氨氧化反体系中氮的去除至关重要。$ N! b8 x. _* a/ y' j6 R* b5 r
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五 结论8 n, l% w* m5 g5 C0 O4 R; P7 M; T
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长期添加1-200 mg/L的Mno2对氮的去除起到了积极作用。NRR与理化特征（沉降速率-Vs）和生物学特征（SAA、血红素C和EPS）有相同的变化趋势。随着Mno2的持续添加，微生物的优势门、纲、属的丰富度和多样性的变化增长趋势一致。厌氧氨氧化菌（Candidatus Kuenenia）总是保持为优势属。从试验结果和经济方面来看， Mno2浓度达到50 mg/L时，该反应体系即可达到最佳效果。本文研究结果表明，Mno2在anammox体系中起重要作用，它不仅能增强该体系的运行性能，还能起催化作用。- V |# G3 r) h) J0 f2 W q+ r
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文章题目：Roles of Mno2 on performance, sludge characteristics and microbial community in anammox system
Q1 ?8 o, ?/ E( w. m8 E发表杂志：Science of the Total Environment
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