一 研究背景
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厌氧氨氧化是一种生物介导反应,在缺氧条件下,自养厌氧氨氧化细菌会以亚硝酸盐为电子受体,将铵盐转化为氮气。该反应与传统的硝化作用和反硝化作用相比,产生的污泥和温室气体量少、无需有机碳和运行成本低等特点。因此,在富氮废水处理工艺中,这种生物除氮方法具有很大的开创性和应用前景。但该体系对多种环境因子较为敏感,在一定程度上限制了厌氧氨氧化反应在工业上的直接应用。因此,研究人员尝试采用富集氨氧化细菌、生物膜或膜反应器、物理、磁化、电子和生物强化技术方法解决这些问题。也有研究人员采用添加化学物质的方法来增强厌氧氨氧化过程。
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锰具有特殊的物理化学性质,锰氧化物在海洋沉积物中扮演了重要的角色。氧化锰的去氧化反应与含氮化合物的转化、氮气的生成紧密相关。研究表明,厌氧氨氧化反应会发生在海洋底泥生态系统中,锰的氧化反应能够促进厌氧氨氧化过程。然而,在人工厌氧氨氧化反应体系中,锰的氧化反应对特异微生物群落的长期影响还未被深入研究,且污水、底泥中的Mno2对厌氧氨氧化反应和特征也是未知的。目前研究发现,不同水流中Mno2的浓度差异较大,厌氧氨氧化反应的最佳Mno2浓度范围仍需要探究。
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二 研究目的 @( r4 I; L; m& `8 r7 l. p
8 L9 t9 R5 A4 F/ Z' {本研究旨在探究Mno2长期暴露对厌氧氨氧化体系中颗粒的影响,主要包括以下几个方面内容:(a)不同浓度的Mno2对氮去除效率的影响;(b)厌氧氨氧化颗粒性能的变化;(c)微生物群落结构的变化。这些信息能够评估厌氧氨氧化体系对微生物群落稳定性的影响,从而进一步提高工艺水平。
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三 材料方法
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污泥获取方法:厌氧氨氧化接种污泥从35±1℃固定温度下运行一年的3.5 L规格升流式厌氧污泥床(UASB)反应器中获取。
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& Z) u3 p8 z+ j c6 i v& k7 k合成污泥组成元素:反应培养所用的合成污泥由铵盐、亚硝酸盐、无机盐溶液和微量元素组成。3 g9 g( n# u$ }/ c( z! s! n
' ~. B k4 \: p& p& U0 c, _9 H测定和分析方法:采用苯酚-次氯酸盐法、N(1萘)-乙二胺法、苯酚-二磺酸法、APHA标准方法、加热萃取方法、蒽酮法和改良酚试剂法等对其进行测定和分析。
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取样和测序处理:取在反应器中运行第25、145和175天时的底泥样品,扩增16S RNA的V4区域,测序并进行微生物群落分析。5 m, F' V S7 D1 a1 i( H
1 c! w z" t, g四 结果与讨论 q! ]6 {8 P& b) H
4 _% y7 p7 @2 E' ^ A1. Mno2对厌氧氨氧化反应的作用
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+ N5 F+ c0 J# T: d- z从P0到P5阶段,流出水的PH值先降后升,且在50 mg/L Mno2时该反应体系即可达到最佳效果。* G5 J O: e: I8 G
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表1 反应器在每个阶段的氮去除性能和化学计量比率% F' t% c6 L7 I
& y" d# y8 c; s& X5 N' ^2.Mno2对厌氧氨氧化反应中生物颗粒特征的影响; B4 J" \' y) \3 I: o0 k
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厌氧氨氧化反应中Mn2+的添加能提高SAA水平。该生物反应对生物量的变化无显著影响(见下图)。
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% s& Y5 M/ v" j$ k, J图1 在不同阶段,反应器中厌氧氨氧化菌的特异厌氧氨氧化活性(SAA)(图A)和生物量的变化。SS:悬浮颗粒,ASS:挥发性悬浮颗粒。 a$ f: ~4 b( |8 b
6 `. r5 p0 ?8 R# y2 U2 J同时,由下图可猜测该反应产生的血红素C与Mno2的添加有关。8 L0 p' S) E( P0 E
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7 O. b$ U7 @3 Z( v3 O n图2 反应器中厌氧氨氧化菌的血红素C含量的变化。4 o7 }: n4 ]2 \, b9 ^
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长期驯化能够提高自养厌氧氨氧化细菌的适应性,Mno2的添加能使微生物产生更多的EPS,EPS的产生可能更有利于脱氮作用。高浓度Mno2使厌氧氨氧化体系有更好的沉降性能。Mno2的长期添加对沉降性能的提高有利(见下图)。9 `. j3 t$ `' n
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+ Z7 `3 A" f z: G2 H图3 不同阶段,MnO2的长期添加对厌氧氨氧化菌的胞外聚合物(EPS)数量(图A)和沉降速度-Vs(图B)的影响。3 a6 F7 w( |8 a( A% D* D( f+ x
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PN:蛋白质,PS:多糖。
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' f5 b6 E# P( n* l5 ?3. 微生物群落组成和多样性 G) R5 K( {! C. Z
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由下可知,随着Mno2的持续添加,微生物群落的多样性也持续升高。: c6 W; F1 R H8 a0 o5 c2 T. P
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4 h+ z# c# e* ?+ Z5 z表2 反应器中污泥样品的细菌多样性指数。
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图4 反应器颗粒污泥中数量比例大于0.5%的微生物群落结构。(A)表示从门类划分。
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图5 反应器颗粒污泥中数量比例大于0.5%的微生物群落结构。(C)表示从属类划分。6 h6 f1 u4 z3 i. S
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图6 反应器颗粒污泥中数量比例大于0.5%的微生物群落结构。
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" o7 W! ]% q/ Q# {/ o. s& ](B)表示从属类划分。
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q7 a5 D8 f( ~! J本文探究了Mno2、细菌和NRR之间的关系。结果显示,浮霉菌门(Planctomycetes)与NRR呈正相关关系,表明在UASB的厌氧氨氧化反应过程中,浮霉菌门(Planctomycetes)对氮的去除起到了积极作用;另外,在该反应中,Candidatus Kuenenia数量比例与TREN值的变化一致,表明Candidatus Kuenenia 对厌氧氨氧化反体系中氮的去除至关重要。5 H2 Q( A; m. X% y1 M* r
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五 结论
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长期添加1-200 mg/L的Mno2对氮的去除起到了积极作用。NRR与理化特征(沉降速率-Vs)和生物学特征(SAA、血红素C和EPS)有相同的变化趋势。随着Mno2的持续添加,微生物的优势门、纲、属的丰富度和多样性的变化增长趋势一致。厌氧氨氧化菌(Candidatus Kuenenia)总是保持为优势属。从试验结果和经济方面来看, Mno2浓度达到50 mg/L时,该反应体系即可达到最佳效果。本文研究结果表明,Mno2在anammox体系中起重要作用,它不仅能增强该体系的运行性能,还能起催化作用。
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) ~5 U2 p5 C) G- r) E文章题目:Roles of Mno2 on performance, sludge characteristics and microbial community in anammox system
+ \) |# A# J! P1 {8 M1 G1 m# z# a发表杂志:Science of the Total Environment& {, p% j) ]' m( @4 A5 u+ F
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