一 研究背景" ~8 e+ W7 A" W9 o. j, |
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厌氧氨氧化是一种生物介导反应,在缺氧条件下,自养厌氧氨氧化细菌会以亚硝酸盐为电子受体,将铵盐转化为氮气。该反应与传统的硝化作用和反硝化作用相比,产生的污泥和温室气体量少、无需有机碳和运行成本低等特点。因此,在富氮废水处理工艺中,这种生物除氮方法具有很大的开创性和应用前景。但该体系对多种环境因子较为敏感,在一定程度上限制了厌氧氨氧化反应在工业上的直接应用。因此,研究人员尝试采用富集氨氧化细菌、生物膜或膜反应器、物理、磁化、电子和生物强化技术方法解决这些问题。也有研究人员采用添加化学物质的方法来增强厌氧氨氧化过程。5 ^1 \# N8 N( T# l+ ?3 h! P" L
8 N% j* f7 k7 U' b3 d* Z锰具有特殊的物理化学性质,锰氧化物在海洋沉积物中扮演了重要的角色。氧化锰的去氧化反应与含氮化合物的转化、氮气的生成紧密相关。研究表明,厌氧氨氧化反应会发生在海洋底泥生态系统中,锰的氧化反应能够促进厌氧氨氧化过程。然而,在人工厌氧氨氧化反应体系中,锰的氧化反应对特异微生物群落的长期影响还未被深入研究,且污水、底泥中的Mno2对厌氧氨氧化反应和特征也是未知的。目前研究发现,不同水流中Mno2的浓度差异较大,厌氧氨氧化反应的最佳Mno2浓度范围仍需要探究。
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二 研究目的" h) M/ J9 n' N4 a% G/ }
9 m6 B+ d: w) U* ^" ~8 j. P本研究旨在探究Mno2长期暴露对厌氧氨氧化体系中颗粒的影响,主要包括以下几个方面内容:(a)不同浓度的Mno2对氮去除效率的影响;(b)厌氧氨氧化颗粒性能的变化;(c)微生物群落结构的变化。这些信息能够评估厌氧氨氧化体系对微生物群落稳定性的影响,从而进一步提高工艺水平。/ m! E2 ~; W' f% E% I. L0 H3 d2 [
% n7 f2 Z Y0 t+ T! t+ {: J三 材料方法* _, D: D& p* d4 z
& t. ?7 |* p) _6 ~污泥获取方法:厌氧氨氧化接种污泥从35±1℃固定温度下运行一年的3.5 L规格升流式厌氧污泥床(UASB)反应器中获取。3 K0 x$ f1 i8 g, ^( p: [$ Q5 [
5 x* A+ g& {* R1 K! x9 t合成污泥组成元素:反应培养所用的合成污泥由铵盐、亚硝酸盐、无机盐溶液和微量元素组成。+ n! j$ S5 s# O6 v- B
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测定和分析方法:采用苯酚-次氯酸盐法、N(1萘)-乙二胺法、苯酚-二磺酸法、APHA标准方法、加热萃取方法、蒽酮法和改良酚试剂法等对其进行测定和分析。
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/ q# Q3 o& U) c取样和测序处理:取在反应器中运行第25、145和175天时的底泥样品,扩增16S RNA的V4区域,测序并进行微生物群落分析。
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. I9 t! v" L9 q4 F6 z四 结果与讨论1 |% Z% S" c5 _. l/ S, ` W+ D c
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1. Mno2对厌氧氨氧化反应的作用5 S6 H6 ^* z' R4 l7 M* [+ I# k
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从P0到P5阶段,流出水的PH值先降后升,且在50 mg/L Mno2时该反应体系即可达到最佳效果。 T3 @) K% r% o! D* ]. J
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表1 反应器在每个阶段的氮去除性能和化学计量比率
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; A* }( n; b* f" ?# s0 J# f, V2.Mno2对厌氧氨氧化反应中生物颗粒特征的影响+ W, J% G6 S, j8 a! n1 }3 \9 n
2 _6 K1 \9 h; q( r1 `厌氧氨氧化反应中Mn2+的添加能提高SAA水平。该生物反应对生物量的变化无显著影响(见下图)。
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8 ]' ] B4 f0 _. Q/ b5 d+ R图1 在不同阶段,反应器中厌氧氨氧化菌的特异厌氧氨氧化活性(SAA)(图A)和生物量的变化。SS:悬浮颗粒,ASS:挥发性悬浮颗粒。: ]1 i, w# r* P" A+ t7 H1 W
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同时,由下图可猜测该反应产生的血红素C与Mno2的添加有关。
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& d' v* y: z5 R; j: c C8 v1 @图2 反应器中厌氧氨氧化菌的血红素C含量的变化。
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长期驯化能够提高自养厌氧氨氧化细菌的适应性,Mno2的添加能使微生物产生更多的EPS,EPS的产生可能更有利于脱氮作用。高浓度Mno2使厌氧氨氧化体系有更好的沉降性能。Mno2的长期添加对沉降性能的提高有利(见下图)。2 m. J0 a$ B% ^8 Y- j
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5 ]* H* `0 A/ W5 v3 }$ r6 N8 P图3 不同阶段,MnO2的长期添加对厌氧氨氧化菌的胞外聚合物(EPS)数量(图A)和沉降速度-Vs(图B)的影响。
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PN:蛋白质,PS:多糖。
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3. 微生物群落组成和多样性
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, p e/ [' ~2 W" l; n, T由下可知,随着Mno2的持续添加,微生物群落的多样性也持续升高。
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表2 反应器中污泥样品的细菌多样性指数。5 Y0 s6 Q$ Q- {5 p3 A; X, S
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图4 反应器颗粒污泥中数量比例大于0.5%的微生物群落结构。(A)表示从门类划分。( G3 _$ i" I6 ^0 A8 J
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图5 反应器颗粒污泥中数量比例大于0.5%的微生物群落结构。(C)表示从属类划分。
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! O$ W* m+ D, a. a0 {图6 反应器颗粒污泥中数量比例大于0.5%的微生物群落结构。
; c- M& c5 X% v1 ^/ E, B; L; |$ K) d! [ x r$ w8 c# {' v, F
(B)表示从属类划分。' U; A! H/ [4 l7 {
& [* D* A0 i$ B本文探究了Mno2、细菌和NRR之间的关系。结果显示,浮霉菌门(Planctomycetes)与NRR呈正相关关系,表明在UASB的厌氧氨氧化反应过程中,浮霉菌门(Planctomycetes)对氮的去除起到了积极作用;另外,在该反应中,Candidatus Kuenenia数量比例与TREN值的变化一致,表明Candidatus Kuenenia 对厌氧氨氧化反体系中氮的去除至关重要。
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8 s" X" v* u( W* h五 结论9 O7 b+ }' Q7 g9 E x
- o4 g; V2 \# ?( }) f长期添加1-200 mg/L的Mno2对氮的去除起到了积极作用。NRR与理化特征(沉降速率-Vs)和生物学特征(SAA、血红素C和EPS)有相同的变化趋势。随着Mno2的持续添加,微生物的优势门、纲、属的丰富度和多样性的变化增长趋势一致。厌氧氨氧化菌(Candidatus Kuenenia)总是保持为优势属。从试验结果和经济方面来看, Mno2浓度达到50 mg/L时,该反应体系即可达到最佳效果。本文研究结果表明,Mno2在anammox体系中起重要作用,它不仅能增强该体系的运行性能,还能起催化作用。+ G* i$ S' x5 O
6 C0 G- I6 m( @, P% Y2 J& _! ] T文章题目:Roles of Mno2 on performance, sludge characteristics and microbial community in anammox system
. n+ l/ x U9 a3 D: J1 U发表杂志:Science of the Total Environment
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